Selektivní médium pro izolaci a presumptivní identifikaci střevních enterokoků metodou membránové filtrace.
Bile Esculin Azide Agar je modifikací agaru Bile Esculin Agar (kat. 1031) s přidáním azidu sodného jako inhibitoru a se snížením koncentrace žluči. Výsledné médium je selektivnější, ale stále poskytuje rychlý růst a účinnou obnovu enterokoků.
Schopnost hydrolyzovat esculin v přítomnosti žluči je charakteristický pro enterokoky. Organismy pozitivní na hydrolýzu eskulinu hydrolyzují glykosid eskulin na eskuletin a dextrózu. Eskuletin reaguje s citrátem železitoamonným za vzniku tmavě hnědé nebo černé kolonie. Volská žluč neinhibuje enterokoky, zatímco ostatní Gram
pozitivní bakterie jsou inhibovány. Azid sodný inhibuje gramnegativní bakterie. Trypton, pepton a kvasnicový extrakt dodávají živiny nezbytné pro růst. Chlorid sodný zajišťuje osmotickou rovnováhu. Ztužujícím činidlem je bakteriologický agar.
Přítomnost střevních enterokoků je indikátorem fekální kontaminace, zejména pokud ke kontaminaci došlo dávno předtím a méně rezistentní koliformní bakterie, včetně Escherichia coli, mohou být již při provádění analýzy mrtvé.
Tolerance žluči a schopnost hydrolyzovat eskulin představuje spolehlivý předpokládaný test pro identifikaci enterokoků. Objeví se hnědá barva (pozitivní reakce) kolem kolonií.
Přibližná definice půdy/1 litr purifikované vody:
Trypton 17.00 g
Bakteriologický agar 15.00 g
Telecí žluč 10.00 g
Kvasničný extrakt 5.00 g
Chlorid sodný 5.00 g
Pepton 3.00 g
Eskulin 1.00 g
Citrát železito-amonný 0.50 g
Azid sodný 0.15 g
Celkové pH: 7.1 ± 0.1 při 25ºC
Příprava:
56,6 g média rozpusťte v jednom litru destilované vody. Dobře promíchejte a za častého míchání zahřívejte. Vařte po dobu jedné minuty až do úplného rozpuštění. Dávkujte do vhodných nádob a sterilizujte v autoklávu při 121ºC po dobu 15 minut. Přehřátí může způsobit ztmavnutí média. Pokud jsou použity zkumavky, zchlazujte je v šikmé poloze. Připravené médium by mělo být skladováno při teplotě 8-15 °C.
